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公司產品僅用于科研
中文名稱： 大鼠正常腎成纖維細胞直銷
簡稱：NRK-49F

種屬：大鼠

來源：腎；成纖維細胞；自發永生

培養基：EMEM

狀態：貼壁

產品規格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE0331
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細胞大鼠正常腎成纖維細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞完全貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養基。

實驗操作：
1、培養瓶預包被。試驗前一天預包培養瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝去外膜面的殘留組織。PBS洗滌凈。
4、除去內皮細胞：將縱向剪開， 內膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內膜層4-5遍，去掉內皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內膜的，繼續刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養液重懸，染色計數細胞。
9、培養細胞密度：調整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養瓶。
10、培養：放置于37℃，5% CO2培養箱中。
1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid ethyl ester  中文名：  分子式：C16H15F2NO4    幽門螺旋桿菌球蛋白Y   英文名稱：   Human Helicobacter pylori IgY   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HP-IgY

1-Cyclopropyl-6,7-difluoro-1,4-dihydro-8-methoxy-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid  中文名：  分子式：C14H11F2NO4    病毒抗體IgG   英文名稱：   Human Hepatitis A Virus IgG   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HAV IgG

1-Chloroethyl cyclohexyl carbonate  中文名：  分子式：C9H15ClO3    病毒e抗原   英文名稱：   Human Hepatitis B e Aigen   規格：   48T/96T   英文縮寫：   HBeAg

1-chloro-6-(5-ethynylthiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C12H7ClOS    鏈球菌(ST)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

1-Chloro-6-(5-(prop-1-ynyl)thiophen-2-yl)hexa-3,5-diyn-2-ol  中文名：  分子式：C13H9ClOS    病毒(MV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T
小鼠調節蛋白   英文名稱：   thrombomodulin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TM  Folic acid  中文名：葉酸  分子式：C19H19N7O6 

小鼠素elisa試劑盒   小鼠素試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠素試劑盒、小鼠素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  Metronidazole  中文名：甲硝唑  分子式：C6H9N3O3  度：99.0%

小鼠素B2(TXB2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Minoxidil  38304-91-5  中文名：米諾地爾  分子式：C9H15N5O  度：98.0%  關鍵詞： 

小鼠素B2(TXB2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Campsiketalin  中文名：  分子式：C10H20O4 

小鼠素A2（TXA2）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Minoxidil  38304-91-5  中文名：米諾地爾  分子式：C9H15N5O
2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3    I 型膠原 N 末端肽 (X)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝

p-Anisoin  119-52-8  中文名：對茴香偶姻  分子式：C16H16O4     (NO)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝  

Benzoin  119-53-9  中文名：安息香  分子式：C14H12O2    神經生長因子   英文名稱：    nerve growth factor    規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGF

3-Benzalphthalide  575-61-1  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2    神經生長因子受體   英文名稱：    nerve growth factor  receptor   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGFR

L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4    中性粒細胞明膠酶相關性載脂蛋白   英文名稱：   Neuophil gelatinase-associated lipocalin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   NGAL
大鼠正常腎成纖維細胞直銷人肌聯蛋白   英文名稱：   Human titin   規格：   48T/96T   英文縮寫：   TTN  Rivaroxaban  366789-02-8  中文名：利伐沙班  分子式：C19H18ClN3O5S  度：98.0%  關鍵詞： 

人骨形成蛋白(BMPs)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Thiamphenicol  15318-45-3  中文名：甲砜霉素  分子式：C12H15Cl2NO5S  度：98.0%  關鍵詞： 

人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  3,3'-Sulfonyldianiline  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S  度：98.0%

人骨膠原交聯(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Benzothiazolyl diethyldithiocarbamate  95-30-7  中文名：二乙基二硫代氨基甲酸 2-苯并噻唑酯  分子式：C12H14N2S3 

人骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3,3'-Sulfonyldianiline  中文名：3,3'-二氨基二苯砜  分子式：C12H12N2O2S
操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。產品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。