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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：無漿體通用PCR檢測試劑盒價格使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Taxilluside A  1661914-46-0  中文名：  分子式：C18H24O10    Humancytovillin/ezrin,CVLELISA試劑盒人細胞絨毛蛋白/埃茲蛋白(CVL)ELISA試劑盒規格：96T/48T

n-Butyl β-D-fructofuranoside  80971-60-4  中文名：基-β-D-果糖苷  分子式：C10H20O6    組織INSULI激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Palmitone  502-73-8  中文名：棕櫚酮  分子式：C31H62O    Humanplasminogenactivatorinhibitor1，PAI-1ELISAKit人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒規格：96T/48T

9-Oxooctadeca-10,12-dienoic acid  54232-58-5  中文名：  分子式：C18H30O3    兔子血纖蛋白原降解產物(FDP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Acetylatractylodinol  61582-39-6  中文名：乙酰蒼術素醇  分子式：C15H12O3    Rat angiopoietin receptor Tie2 (ANG-R-Tie2) ELISA Kit 大鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA試劑盒
Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6    兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

2-Methylanthraquinone  84-54-8  中文名：2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O2    Human adenosine three phosphate binding cassette anspoer A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三0酸結合盒轉運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒

1-Hydroxy-2-methylanthraquinone  6268/9/3  中文名：1-羥基-2-甲基蒽醌  分子式：C15H10O3    Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

Anthraglycoside B  23313-21-5  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10    HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Torososide A  165689-32-7  中文名：  分子式：C38H32O15    組織NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次
無漿體通用PCR檢測試劑盒價格5,10-二氫-5,10-二甲基吩嗪(>98.0%(GC)(N))  5,10-Dihydro-5,10-dimethylphenazine  質量規格：>98.0%(GC)(N) 人酰化刺激蛋白(ASP)ELISA檢測試劑盒HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 96T/48T

雙(羰基二硫代)四硫富瓦烯(>95.0%(W))  Bis(carbonyldithio)tetrathiafulvalene  質量規格：>95.0%(W) 大鼠素E2(PGE2)試劑盒 Rat Prostaglandin E2,PGE2 ELISA Kit

1,2-苯二硫醇(>95.0%(GC))  1,2-Benzenedithiol  質量規格：>95.0%(GC) 英文名稱RatTG-AbELISAKit大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(TG-Ab)ELISA試劑盒規格：96T/48T

4,5-雙(甲硫代)-1,3-二硫醇-2-酮(>98.0%(GC))  4,5-Bis(methylthio)-1,3-dithiol-2-one  質量規格：>98.0%(GC) 膠原酶潛酶活化劑(APMA)500微升

二巰基馬來腈二鈉(>90.0%(N))  Di Dimercaptomaleonitrile  質量規格：>90.0%(N) ELISAKitVD人維生素D規格：48T/96T

4,5-亞乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))  4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione  質量規格：>98.0%(GC) 小鼠多萜長醇二0酸寡糖蛋白環糊精糖基轉移酶(DDOST/OST-48)ELISA試劑盒 ，英文名： DDOST/OST-48 ELISA Kit

4,5-乙撐二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))  4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one  質量規格：>98.0%(GC) 大鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA檢測試劑盒RatCollageypeⅣ,ColⅣELISAKIT 96T/48T

4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))  4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one  質量規格：>95.0%(HPLC) 人白介素1β前體(pro-IL1B)試劑盒 Human pro ierleukin 1 beta,pro-IL1B ELISA Kit

3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))  3,3'-Bithiophene  質量規格：>98.0%(GC) 英文名稱MouseLaminaPropriaLymphocyteELISAKit小鼠脂蛋白脂酶(LPL)規格：96T/48T

2,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))  2,1,3-Benzothiadiazole  質量規格：>99.0%(GC) PH4-5顯色(BROMOCRESOLGREEN)指示溶液50毫升
D-酪氨酸  D-Tyrosine  質量規格：>98%,BR 人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒 Human Stem Cell Factor Receptor,SCFR ELISA kit

D-組氨酸  D-Histidine  質量規格：>98%,BR 人剛地弓形蟲(T.gondii)試劑盒 Human Toxoplasma Gondii,T.gondii ELISA Kit

D-丙氨酸甲酯鹽酸鹽  D-Alanine Methyl Ester Hydrochloride  質量規格：0.98 人高半胱氨酸(Hcy)試劑盒 Human Homocysteine,HCY ELISA Kit

D-丙氨酸叔丁酯鹽酸鹽  D-Alanine tert-Butyl Ester Hydrochloride  質量規格：0.99 人高爾基蛋白73(GP-73)試劑盒 Human GP-73 ELISA Kit

D-精氨酸  D-Arginine  質量規格：0.98 人高爾基體抗體(AGAA)試劑盒 Human ai-golgi apparatus aibody,AGAA ELISA Kit

非對稱二甲基精氨酸  ADMA  質量規格：>98%,鹽酸鹽形式，美國進口 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)ELISA檢測試劑盒HumancytokeratinHighMolecularWeight,CK-HMWELISAKit 96T/48T

N'-硝基-D-精氨酸  N'-Nitro-D-arginine   質量規格：0.98 人高分子量細胞角蛋白(CK-HMW)試劑盒 Human cytokeratin High Molecular Weight,CK-HMW ELISA Kit

D-天冬酰胺，一水  D-Asparagine monohydrate  質量規格：0.99 人高分子量脂聯素(HMW Adiponectin)試劑盒 Human High Molecular Weight Adiponectin,HMW Adiponectin ELISA Kit

D-天冬氨酸  D-Aspartic acid   質量規格：0.98 人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒 human ulasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit

D-天冬氨酸4-叔丁酯  D-Aspartic acid 4-tert-butyl ester  質量規格：0.98 人(HDL)ELISA檢測試劑盒HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit 96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。