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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：禽致病性大腸桿菌1血清型PCR檢測試劑盒直銷使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

Tropicamide  1508-75-4  中文名：托吡卡胺  分子式：C17H20N2O2  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠孕受體elisa試劑盒   小鼠孕受體試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠孕受體試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠孕受體試劑盒、小鼠孕受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Trityl candesartan cilexetil  170791-09-0  中文名：  分子式：C52H48N6O6  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠孕激素elisa試劑盒   小鼠孕激素試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠孕激素試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠孕激素試劑盒、小鼠孕激素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Trityl candesartan  139481-72-4  中文名：  分子式：C43H34N6O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠誘導型NO合酶elisa試劑盒   小鼠誘導型NO合酶試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠誘導型NO合酶試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠誘導型NO合酶試劑盒、小鼠誘導型NO合酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。

Triptoquinone A  142950-86-5  中文名：  分子式：C20H24O4  度：%  關鍵詞：    小鼠游離狀腺原酸elisa試劑盒   小鼠游離狀腺原酸試劑盒   規格型號：96T/48T   小鼠游離狀腺原酸試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：小鼠游離狀腺原酸試劑盒、小鼠游離狀腺原酸elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質期：6個月。  

Trimethoprim  738-70-5  中文名：甲氧芐啶  分子式：C14H18N4O3  度：98.0%  關鍵詞：    小鼠孕受體(PROGR)ELISAkit
6-Amino-1,3-dimethyluracil  6642-31-5  中文名：  分子式：C6H9N3O2    Humancytokeratin20,CK20ELISA試劑盒人細胞角蛋白20(CK20)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Metoclopramide  364-62-5  中文名：甲氧氯普胺  分子式：C14H22ClN3O2    組織HSV(HERPESSIMPLX)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

Amiodarone hydrochloride  19774-82-4  中文名：鹽酸胺酮  分子式：C25H30ClI2NO3    HumanplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒規格：96T/48T

Zidovudine  30516-87-1  中文名：齊多夫定  分子式：C10H13N5O4    兔子中性粒細胞彈性蛋白酶(NE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Lamivudine  134678-17-4  中文名：拉米夫定  分子式：3O3S    Human cyclin D3 (Cyclin-D3) ELISA Kit 人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
禽致病性大腸桿菌1血清型PCR檢測試劑盒直銷金胺O（標準品）  AURAMINE O   質量規格：檢查 大鼠胰島細胞抗體(ICA)ELISA檢測試劑盒Ratisletcellaibody,ICAELISAKit 96T/48T

胭脂紅（標準品）  Carmine  質量規格：檢查 人白介素28A(IL-28A/IFN-λ2)試劑盒 Human Ierleukin 28A,IL-28A/IFN-λ2 ELISA kit

赤蘚紅（標準品）  Acid Red 51  質量規格：檢查 英文名稱MouseHLA-2ELISAKit小鼠組織相容性抗原(HLA-2)規格：96T/48T

酸性紅 73（標準品）  Acid Red 73  質量規格：檢查 pCAMBIA+目的基因植物表達

（標準品）  Lauric acid  質量規格：含量測定 PorcineProgesterone,PROGELISA試劑盒豬孕激素/孕同(PROG)ELISA試劑盒規格：96T/48T

7,4'-二羥基黃酮（標準品）  7,4'-DIHYDROXYFLAVONE  質量規格：供含量測定用 小鼠鈣調素(CAM)ELISA試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

千金子素L1（標準品）  Euphorbiasteroid  質量規格：供含量測定用 大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA檢測試劑盒RatAi-ypsin,ATELISAKit 96T/48T

異型南五味子丁素（標準品）  heteroclitin D  質量規格：含量測定 人白介素26(IL-26)試劑盒 Human Ierleukin 26,IL-26 ELISA Kit

紫蘇醛（標準品）  (-)-PERILLALDEHYDE  質量規格：含量測定 英文名稱MouseHLA-1ELISAKit小鼠組織相容性抗原(HLA-1)規格：96T/48T

相思子堿（標準品）  L-ABRINE  質量規格：供鑒別用 pcDNA3.1+目的基因真核表達
N-羥乙酰神經氨酸  N-Glycolylneuraminic Acid  質量規格：美國進口 植物組織DNA損傷彗星熒光檢測試劑盒20

N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀-d5  N,N-Didesmethyl Trimebutine-d5 Hydrochloride  質量規格：美國進口 植物組織可溶性總蛋白制備試劑盒20

N,N-二去甲基鹽酸曲美布汀  N,N-Didesmethyl Trimebutine Hydrochloride  質量規格：美國進口 植物組織膜性囊泡(vacuole)分離試劑盒20

N-去甲基鹽酸曲美布汀  N-Demethyl Trimebutine Hydrochloride  質量規格：美國進口 植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/FeSOD)分離試劑盒50

柚皮素-4'-O-β-D-葡萄糖苷酸  Naringenin-4'-O-beta-D-Glucuronide  質量規格：美國進口 植物組織線粒體形態/活性熒光染色試劑盒20

(±)-柚皮素  (±)-Naringenin  質量規格：美國進口 植物組織質膜(plasmamembrane)分離試劑盒20

3-羥基環苯扎林  3-Hydroxy Cyclobenzaprine  質量規格：美國進口 質粒/蛋白制備樣品內比色法定量檢測試劑盒20

環苯扎林 N-β-D-葡萄糖苷酸  Cyclobenzaprine N-β-D-Glucuronide  質量規格：美國進口 相關凋亡誘導配體3(AIL-R3)ELISA檢測試劑盒Monkeytumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AIL-R3ELISAKit 96T/48T

去甲基鹽酸環苯扎林  Desmethyl Cyclobenzaprine Hydrochloride  質量規格：美國進口 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)ELISA檢測試劑盒PorcineprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 96T/48T

δ9(11)-甲基睪酮  Delta9(11)-Methyltestosterone  質量規格：美國進口 豬α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒PorcineIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。