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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術服務內容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。

特點優勢：
1. 特異性：牛病毒型PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析，經過GenBank及自建龐大數據庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段，可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
 2.   重現性：該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證，重現性為100%。
3.   靈敏性：該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優勢2：該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

檸檬酸（CA）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2 

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  關鍵詞： 

鎳測試盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%

尿酸含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Tropisetron hydrochloride  105826-92-4  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2 

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用：   ELISA   規格：   48T/96T   進口分裝     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3
Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S    普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O    莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  13369-74-9  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2    瑞氏－姬姆薩復合染液   Vascular permeability test solion

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  23190-16-1  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO    姬姆薩染液   Peroxidase staining

5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S    巴氏染液（脫落細胞染色）   Name
牛病毒型PCR檢測試劑盒供應甘草酸二銨鹽  Diammonium Glycyrrhizate  質量規格：UV≥97%,BR ELISAKitANG人生長素規格：48T/96T

橄欖苦苷（標準品）  Oleuropein  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠核連蛋白1(NUCB1)ELISA試劑盒 ，英文名： NUCB1 ELISA Kit

高麗槐素(標準品)  Maackiain  質量規格：HPLC≥98%，標準品 人甘露糖受體(MR)ELISA檢測試劑盒Humanmannosereceptor,MRELISAKit 96T/48T

高良姜素(標準品）  Galangin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 大鼠褪黑素(MT)試劑盒 Rat Melatonin,MT ELISA Kit

高三尖杉酯堿(標準品）  Homoharringtonine  質量規格：HPLC≥98%，標準品 英文名稱RatGlycogenphosphorylaseIIELISAKit大鼠糖原0酸化酶同工酶II(GPII)規格：96T/48T

高香草酸(標準品)  Homovanillic acid  質量規格：HPLC≥98%，標準品 胡蘿卜(carrot)完全培養基500毫升溶液/片劑

告達亭苷元  caudatin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 ELISAKitVCAM-1/CD106人內皮細胞粘附分子1規格：48T/96T

格列風內酯（標準品）  Griffonilide  質量規格：HPLC≥98%，標準品 小鼠核苷酸還原酶M1(RRM1)ELISA試劑盒 ，英文名： RRM1 ELISA Kit

葛根素(標準品)  Puerarin  質量規格：HPLC≥98%，標準品 人甘露糖(Mannose)ELISA檢測試劑盒HumanMannoseELISAKit 96T/48T

葛根素  Puerarin  質量規格：HPLC≥98%，BR 大鼠突觸體素/突觸素(Syp/SYN)試劑盒 Rat Synaptophysin,Syp ELISA kit
苯并［g,h,i］芘(標準品)  Benzo[ghi]perylene  質量規格：分析標準品 犬α-3干擾素(IFN-α3)試劑盒 Canine Ierferon alpha-3,IFN-α3 ELISA kit

1-十八烯(標準品)  1-Octadecene  質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒CanineIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T

辛胺(標準品)  n-Octylamine  質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)試劑盒 Dog β2-microglobulin,BMG/β2-MG ELISA Kit

十八烷(標準品)  Octadecane  質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬β內啡肽(β-EP)ELISA檢測試劑盒CanineBeta-Endorphin,β-EPELISAKit 96T/48T

2-辛酮(標準品)  2-Octanone  質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬β內啡肽(β-EP)試劑盒 Canine Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit

苯氧乙酸(標準品)  Phenoxyacetic acid  質量規格：分析標準品 犬γ氨基(GABA)ELISA檢測試劑盒CanineGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit 96T/48T

菲(標準品)  Phenanthrene  質量規格：分析標準品,用于環境分析 犬γ氨基(GABA)試劑盒 Canine Gamma-aminobyric acid,GABA ELISA Kit

芘(標準品)  Pyrene  質量規格：分析標準品 犬γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 Dog Ierferon γ ,IFN-γ ELISA Kit

(-)-鹽酸東莨菪堿(標準品)  (?)-Scopolamine hydrochloride  質量規格：分析標準品,99.0% 犬癌胚抗原(CEA)試劑盒 Canine carcinoembryonic aign,CEA ELISA Kit

十四烷(標準品)  Tetradecane  質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) 犬白介素1(IL-1)試劑盒 Canine Ierleukin 1,IL-1 ELISA Kit
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。