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免疫熒光技術的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其完全覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。

英文名稱   Anti-RING5
中文名稱  環指蛋白5抗體（E3泛素蛋白連接酶RNF5）
濃    度  1mg/1ml 
規 格  0.2ml/200μg
抗體來源  Rabbit
克隆類型  polyclonal 
交叉反應   Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse 
產品類型     一抗
別    名  E3 ubiquitin protein ligase RNF5; G16; HsRma1; NG2; OTTHUMP00000029107; Protein G16; Ring finger; protein 5; RING5; RMA1; RNF 5; RNF5_HUMAN.
研究領域    細胞生物 細胞生物標志物
蛋白分子量   predicted molecular weight: 20kDa
性    狀  Lyophilized or Liquid 
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human RING5 (51-100aa)
亞    型  IgG 
純化方法  affinity purified by Protein A 
儲 存 液   Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
產品應用    WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

抗體制備過程：

1.材料與試劑
  a．提取的動物 Ig
  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
  c．青霉素和鏈霉素
  d．實驗動物 兔
  e．其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試，查看免疫效果。
5、如果免疫成功，殺死實驗活體，采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

抗原準備：
經常使用的抗原有：偶聯多肽、偶聯的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節約抗原等目的，通常采用加佐劑的方法以刺激機體產生較強的免疫應答。
多克隆抗體和單克隆抗體的區別：
由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體。而同一種抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆來產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。多克隆抗體是由異源抗原（大分子抗原、半抗原偶聯物）刺激機體產生免疫反應，有機體漿細胞分泌的一組免疫球蛋白。
效價測定：采用瓊脂擴散法。
⑴ 將血清倍比稀釋，加入外周孔。
⑵ 中間孔加動物 Ig。
⑶ 37℃濕盒瓊擴24 小時后觀察結果。 

實驗原理：
（1）特異性結合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞，通常需要補體或吞噬細胞等共同發揮效應以清除病原微生物或導致。然而，抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合，直接發揮中和病毒的作用。 
（2）活補體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。 
（3）結合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結合不同種的細胞，參與免疫應答。 
（4）可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動
免疫。免疫球蛋白A（IgA）可通過及粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。 
（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質，也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 
（6）抗體對理化因子的與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在 上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經透析法將其純化。
草魚腎細胞;GIK檸檬苦素，黃柏內酯(橙皮提取) Limonin質量規格：HPLC≥98%,橙皮提取

615小鼠滑膜瘤株;ZM755 小鼠膀胱平滑肌細胞完全培養基 100mL硬脂酸(50%)Stearic acid質量規格：含量50%，藥用級

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse硬脂酸(98%)Stearic acid質量規格：含量98%,藥用級

EPCAM Others Mouse 小鼠 EpCAM / OP1 / CD326 人細胞裂解液 (陽性對照) 牛蒡苷元(標準品)Arctigenin質量規格：HPLC≥98%，標準品

人正常上皮細胞;MCF 10A牛蒡子苷（標準品）Arctiin質量規格：HPLC≥98%，標準品
人細胞;SMMC-7721固K鹽Fast Black K Salt質量規格：>80%,BR

MG-63細胞，細胞 人細胞,CNE細胞 CL-0248ZR-75-30(人癌細胞)5×106cells/瓶×2氨基10BAmido black 10B質量規格：AR

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS21-癸烷磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-10質量規格：離子對色譜用試劑

VEGFC Others Human 人 VEGF-C 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-十一烷基磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-11質量規格：離子對色譜用試劑

肺動脈成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-十二烷基磺酸鈉[離子對色譜級]IPC-ALKS-12質量規格：離子對色譜用試劑
LLC-MK2 恒河猴腎細胞鈀粉(>99%,BR)質量規格：>99%,BRPalladium, powder

CM-H027人成纖維細胞完全培養基100mL乙酸副品紅(>85%,BS)質量規格：>85%,BSPararosaniline acetate

SKOV3/Taxol-25, 人紫杉醇耐藥細胞株鈣激活鉀通道阻斷劑來源于覃青霉質量規格：>98%,BC Paxilline*, from Penicillium paxilli

人細胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS] 大鼠肺平滑肌細胞完全培養基 100mL青霉酸(>98% (HPLC),BC)質量規格：>98% (HPLC),BCPenicillic acid

子宮內膜上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硝酸奧昔康唑（標準品）質量規格：HPLC法含量測定Oxiconazole Nitrate
環指蛋白5抗體（E3泛素蛋白連接酶RNF5）規格人細胞;AsPC-1甲基-α-D-半乳糖苷100克

VSIG4 Others Mouse 小鼠 VSIG4 人細胞裂解液 (陽性對照) 流吩嗪(-20℃) 5-Mqthylphqnczinium mqthosulfctq 1999/11/6

人胚肺二倍體細胞;KMB-17IMIDAZOLECHROMA.BUFFER,5X,PH7.0咪唑層析緩沖液蛋白組學級100MLCOLD

AGT Others Mouse 小鼠 AGT / SerpinA8 人細胞裂解液 (陽性對照) 三乙酸100毫克保存：-20℃

NCI-H1975 人(化啶)

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